1.范圍

本標準規定了甲胺磷等有機磷和克百威等氨基甲酸醋類農藥在蔬菜中的殘毒快速檢測方法。
本標準適用于葉菜類(除韭菜)、果菜類、豆菜類、瓜菜類、根菜類(除胡蘿 卜、菱白等)中甲胺磷、氧化 樂果、對硫磷、甲拌磷、久效磷、倍硫磷、殺撲磷、敵敵畏、克百威、涕滅威、滅多威、抗蚜威、丁硫克百威、甲 蔡威、丙硫克百威、速滅威、殘殺威、異丙威等的農藥殘毒快速檢測

2 原理

    有機磷和氨基甲酸醋類農藥能抑制昆蟲中樞和周圍神經系統中乙酞膽堿酶的活性，造成神經傳導介質乙酞膽堿的積累，影響正常傳導，使昆蟲中毒致死，根據這一昆蟲毒理學原理，用在對農藥殘留的檢測中。加人反應試劑后，用分光光度計測定吸光值隨時間的變化值，計算出抑制率，判斷蔬菜中含有機磷

或氨基甲酸酷類農藥的殘毒情況。即:
乙酞膽堿醋酶+有機磷或氨基甲酸醋類農藥一 酶活性被抑制活性被抑制一 樣本中含有機磷或氨基甲酸醋類農藥乙酞膽堿醋酶+樣本提取液 活性正常一 樣本中不含有機磷或氨墓甲酸酷類農藥如以乙酞硫代膽堿(AsCh)為底物，在乙酞膽堿酷酶(AChE)的作用下乙酞硫代膽堿(AsCh)水解成硫代膽堿和乙酸，硫代膽堿和二硫雙對硝基苯甲酸(DTNB)產生顯色反應，使反應液呈黃色，在分光光度410nm處有**吸收峰，用分光光度計可測得酶活性被抑制程度(用抑制率表示)。
3 試劑 pH8磷酸緩沖液。
4丁酞膽堿醋酶:根據酶活性情況按要求用緩沖液溶解，AA值控制在0.4-0.8之間
5 底物:碘化硫代丁酞膽堿(s-butyrylthiocholineiodide，即BTCD，用緩沖液溶解。

6顯色劑:二硫代二硝基苯甲酸5〔,5-dithiobis(nitrobenzoicacid，即DTNB)，用緩沖液溶解

7 儀器了波長為4工。nm士3nn)專用速測儀，或可見光分光光度計。
中華人民共和國農業部2001一06-01批準                                          2001門0一01實施

8微型樣品混合器
9臺式培養箱
10可調移液槍:(10^1001,L,1-5ml)
概不銹鋼取樣器(內徑2cm),
11 配套玻璃儀器及其他配件等。
12 檢測門取樣用不銹鋼管取樣器取來自不同植株葉片(至少8^10片葉子)的樣本;果菜從表皮至果肉1- 1.5cm處取樣。
檢測過程
取2g切碎的樣本(非葉菜類取4g),放人提取瓶內，加人20mL緩沖液，震蕩1^-2min，倒出提取
液，靜止3^-5min;于小試管內分別加人50IL酶,3mL樣本提取液，50pL顯色劑，于37-38C下放置
30min后再分別加人50ML底物，倒人比色杯中，用儀器進行測定。

檢測結果計算
檢測結果按式((1)計算:

式中:AA— 對照組3min后與3min前吸光值之差;

     AA,— 樣本3min后與3min前吸光值之差。
抑制率)70%時，蔬菜中含有某種有機磷或氨基甲酸酷類農藥殘毒。此時樣本要有2次以上重復檢

測，幾次重復檢測的重現性應在80%以上

6最低檢出濃度